Ультратом — основы гистологии

Содержание
  1. Морфологическая диагностика, как фактор повышения эффективности лечения рака
  2. С каким образцами опухолевых клеток работает патоморфология?
  3. Зачем изучать опухоли под микроскопом?
  4. Гистология и иммуногистохимия — в чем отличие?
  5. Зачем нужно иммуногистохимическое исследование?
  6. Лечим метастазы. Когда не обойтись без патоморфолога?
  7. Какой рак можно вылечить без операции?
  8. Как повысить качество морфологической диагностики в клиниках России?
  9. Почему следует выбрать патоморфологическую лабораторию МИБС?
  10. Как заказать морфологическое / иммуногистохимическое исследование в МИБС?
  11. Приготовление гистологических срезов
  12. Приготовление образцов
  13. Методы гистологического исследования
  14. Микротомы и их применение
  15. Резание на микротоме
  16. Иммуногистохимия — показания к проведению, как делают, результат после процедуры
  17. Суть
  18. Исторический экскурс
  19. Зачем проводить после гистологии?
  20. Задачи ИГХ в борьбе с раком
  21. Виды
  22. Этапы
  23. Перспективы
  24. Мишени
  25. Плюсы
  26. Сроки выполнения
  27. Роль в современной онкологии
  28. Гистология при онкологии и раке в Москве, проведение гистологических исследований в Европейской клинике
  29. Как получают материал для гистологического исследования?
  30. Как выполняется биопсия?
  31. Виды гистологического исследования
  32. Показания для проведения гистологического исследования
  33. Результат гистологического исследования
  34. Гистологические исследования
  35. Когда назначают гистологическое исследование?
  36. Как происходит забор материала?
  37. Расшифровка результатов

Морфологическая диагностика, как фактор повышения эффективности лечения рака

Ультратом - основы гистологии

Эффективность лечения рака зависит не только от развития методов терапии — без постановки точного морфологического диагноза врач-онколог не может выбрать подходящий для конкретной опухоли вид лечения.

Важным компонентом современной онкологической помощи, который, к сожалению, часто остается в тени достижений технологий разрушения опухолей, является правильная постановка диагноза. А точнее — определение типа опухолевых клеток и, соответственно, их устойчивости к различным видам внешнего воздействия.

Решает эту задачу морфологическая диагностика, базовый принцип которой — исследование образцов опухолевых клеток.

С каким образцами опухолевых клеток работает патоморфология?

Базой для морфологической диагностики являются образцы тканей (фрагменты опухолей).

Наиболее частым способом забора материала является трепан-биопсия, которая осуществляется при помощи специальной толстой иглы, также используется инцизионная биопсия, которая выполняется при помощи скальпеля и эксцизионная биопсия с тотальным забором пораженного участка (например, биопсия лимфоузла при диагностике лимфом).

После образцы тканей проходят этапы специальной подготовки (фиксации и проводки), после чего пропитываются парафином с формированием блока. Из блоков на специальных устройствах (микротомах) приготавливаются тонкие срезы толщиной 4-5 микрон. Полученные срезы помещаются на стекла, подвергающиеся различным методам окраски с целью выделения различий в клеточных структурах. Эти, так называемые, “стекла”, подлежат тщательному рассмотрению врачом-патоморфологом.

Каждый из этапов подготовки образцов критичен для возможности и точности последующих молекулярных методов исследования, поэтому нарушение технологии подготовки может привезти к неправильному назначению лечения.

Зачем изучать опухоли под микроскопом?

Количество известных разновидностей опухолей — велико. Наиболее полной считается классификация Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), которая в печатном виде представляет собой 11 томов, около 400 страниц в каждом. Итог — ошибки в постановке диагноза неизбежны.

Патоморфологическая классификация опухолей Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) едва уместилась в 11 томов

Показатель ошибок при постановке диагноза поражает: от 5 до 50% всех онкологических диагнозов в мире — неверны.

Половина этих ошибок не становятся фатальными — различные виды рака могут одинаково реагировать на определенный подход к лечению.

Но значительная часть  неточностей приводит к неадекватному лечению рака у пациентов, которое может способствовать прогрессированию заболевания.

Среди объективных причин ошибочных диагнозов, связанных с морфологической диагностикой, лидирует невозможность получения образца опухолевой ткани для ее морфологического исследования ввиду трудности доступа либо тяжелого состояния пациента.

Среди субъективных причин ошибок морфологической диагностики наиболее распространены:

  1. ошибка при заборе материала (например, при раке простаты следует проводить множественный забор образцов, т.к. опухоль в этом органе может иметь крайне сложную пространственную форму);
  2. отсутствие возможности конкретного лечебного учреждения провести морфологическую диагностику в необходимом объеме (собственная морфологическая лаборатория — это сложный и дорогой институт);
  3. нарушения протоколов как в части отказа от забора и морфологического исследования образцов, так и в части стандартов проведения морфологической диагностики опухоли (в том числе и устаревшие методики, отсутствие необходимого оборудования, низкая квалификация специалистов, на повышение которой не выделяется средств).

И только морфологическая диагностика, проведенная с соблюдением всех стандартов взятия материала, подготовки и рассмотрения образцов, способна дать окончательный ответ о типе опухоли и ее особенностях.

Гистология и иммуногистохимия — в чем отличие?

Первоначально, морфологическая диагностика решала задачу определения наличия злокачественного процесса в ткани. Для этого применялся метод, который в современной медицине называется “гистологическое морфологическое исследование”, или, как часто можно услышать от пациентов “гистология”.

С помощью гистологического морфологического исследования может быть проведена дифференциальная диагностика доброкачественных процессов и злокачественной опухоли — т.е. определение наличия измененных (атипичных) клеток в образце тканей.

Простое гистологическое исследование в любом случае носит субъективный характер и зависит от профессионализма проводящего его врача.

Поэтому, при подозрении на наличие опухоли, второе мнение от ведущих экспертов МИБС в этой области значительно снижает риск ошибочного диагноза.

При подтверждении опухолевого процесса в тканях, пациенту требуется более точная диагностика, которая точно определит тип опухоли и укажет на наиболее эффективный подход к ее лечению — иммуногистохимия.

Зачем нужно иммуногистохимическое исследование?

Основой иммуногистохимии является окрашивание клеток специфическими веществами, которые реагируют на определенные типы опухолевых клеток и “мишени”, специфические свойства и мутации генов конкретного типа рака.

Пример иммуногистохимии в МИБС: Позитивная реакция на СК14 (коричневое окрашивание) вокруг всех подозрительных структур исключает рак молочной железы – дополнительное лечение пациентке не требуется

Таким образом, иммуногистохимия позволяет точно указать нозологию (разновидность) опухоли, что чрезвычайно важно для проведения адекватного лечения, а также – для прогнозирования развития заболевания. Например, некоторые разновидности рака молочной железы (тубулярный, фиброматоз-подобный) не требуют иного лечения, кроме хирургического.

Иммуногистохимия в МИБС: Позитивная реакция на bcl10 в лимфоидных клетках конъюнктивы глаза (коричневое окрашивание вокруг фолликула) подтверждает диагноз MALT-лимфомы, при которой наибольшего эффекта покажет химиотерапия, а не хирургическое лечение

Лечим метастазы. Когда не обойтись без патоморфолога?

Метастазы представляют собой “копию” злокачественных клеток первичной опухоли, точнее, того типа тканей, из которых развилось новообразование. Поэтому тип клеток метастаза может указать на локализацию первичного рака.

Это крайне важно, если первичная опухоль не проявляет себя симптомами и не диагностирована. С другой стороны, если первичная опухоль, имеет уязвимость к препаратам таргетной терапии, то ее метастазы могут утратить это свойство.

В таком случае иммуногистохимия образца метастазов покажет, что для первичной опухоли лечение будет прежним, а вот для метастазов следует избрать другой подход.

Благодаря развитию методов молекулярной диагностики (иммуногистохимия, ПЦР, секвенирование), лекарственная терапия рака идет большими шагами вперед. Помимо химиотерапии, сейчас активно используются таргетные препараты, целенаправленно воздействующие на мишени в опухолевых клетках (HER2, CD20, c-kit, мутантный b-Raf и др.).

Кроме того, в настоящее время онкология переживает «бум» иммунотерапии, при применении которой лекарственные препараты разрывают порочный механизм, препятствующий уничтожению опухолей собственными иммунными клетками.

Однако для правильного назначения таких препаратов необходимым условием является  определение специфических маркеров при помощи иммуногистохимического или молекулярно-генетического исследования опухолевой ткани.

Более того, часто маркеры, указывающие на чувствительность к иммунотерапии (MMR, MSI), также говорят о том, что пациенту не следует назначать химиотерапию, в особенности это касается рака толстой кишки и желудка.

Иммуногистохимия показала, что негативная реакция на MSH2 (синее окрашивание ядер опухоли, коричневое окрашивание неопухолевой ткани) свидетельствует о том, что рак тела матки, представленный на данном слайде, чувствителен к иммунотерапии

Какой рак можно вылечить без операции?

Некоторые разновидности опухоли не только не требуют хирургического лечения, но оно им противопоказано, так как может привести к прогрессированию заболевания. Это прежде всего лимфома, опухоль, возникающая из лимфоцитов, которые располагаются как в лимфоузлах, так и в паренхиматозных органах.

Развитие иммуногистохимии и основанных на ее результатах таргетной терапии и иммунотерапии постоянно расширяют спектр видов рака, которые можно вылечить “точечным” воздействием исключительно на опухолевые клетки. Помимо лечения лимфомы, по состоянию на начало 2019 года наибольшее применение методы иммунотерапии и таргетного лечения получили при лечении таких заболеваний, как:

при которых современные протоколы лечения требуют выполнение иммуногистохимии. Большинство ошибок в диагностике и лечении данных заболеваний связано либо с не проведением иммуногистохимии, либо с ее неправильной интерпретацией.

Цена ошибки, к сожалению, может быть фатальной, так как назначение неправильного лечения может привести к резистентности (устойчивости) опухолевых клеток к лекарственным препаратам, которые при правильном назначении часто приводят к выздоровлению пациента.

Как повысить качество морфологической диагностики в клиниках России?

Выбирайте МИБС как для первого проведения базовой морфологической диагностики либо иммуногистохимического исследования, так и для получения второго мнения от ведущих специалистов нашей медицинской компании относительно имеющихся образцов ткани опухоли (часто называемого пациентами “пересмотр стёкол”), полученных при обследовании в другом онкоцентре.

Почему следует выбрать патоморфологическую лабораторию МИБС?

  1. исследование и оценка рассматриваемого материала проводится одновременно несколькими ведущими специалистами в центральной патоморфологической лаборатории МИБС в Санкт-Петербурге, сотрудничающей с федеральными онкологическими центрами.
  2. все вопросы логистики центр МИБС в вашем регионе берет на себя.
  3. МИБС владеет всеми технологиями, необходимыми для постановки правильного  патоморфологического диагноза. От вас не потребуется проводить дополнительные исследования в других лабораториях.
  4. Иммуногистохимическое исследование может быть проведено в полном объеме за счет средств ОМС (бесплатно для пациента) при наличии направления по форме 14у.

Как заказать морфологическое / иммуногистохимическое исследование в МИБС?

  1. позвоните в любой центр МИБС в вашем регионе;
  2. привезите материал (гистологические препараты, парафиновые блоки, копию выписки из истории болезни и прочие документы, описывающие характер заболевания) в центр МИБС вашего города;
  3. получите заключение через 3-10 дней (в зависимости от вида и объема исследования).

Приготовление гистологических срезов

Ультратом - основы гистологии

Изучение патологических процессов на клеточном и тканевом уровне производится при помощи микроскопических исследований. Гистологический метод исследования необходим для изучения строения и функции клеток в состоянии нормы, патологии и экспериментальном периоде. Для гистологического исследования берутся элементы тканей и органов. Толщина исследуемого образца не может превышать 1 см3.

Образцы тканей могут браться у человека сразу после смерти (чем быстрее, тем лучше) – аутопсия. Также материал может браться во время операции или непосредственно в диагностических целях при помощи специальных инструментов – биопсия.

Приготовление образцов

Приготовление образцов происходит в несколько этапов:

  • Фиксация материала.
  • Приготовление среза.
  • Процесс окрашивания среза.

Суть фиксации материала заключается в остановке естественных процессов в тканях и клетках. Это необходимо для того, чтобы во время купировать процесс гниения и ферментативные изменения в структуре тканей.

В фиксируемых тканях за счет физико-химических процессов происходит свертывание (коагуляция) белков и липоидной составляющей. Это состояние позволяет тканям долго храниться в неизменном виде, без реакции на различные воздействия. Проще говоря, фиксация тканей проводится с целью сохранения прижизненной структуры биологического материала.

Для фиксации тканей применяются специальные жидкости (фиксаторы). Наиболее популярными фиксаторами можно назвать следующие варианты жидкостей:

  • Формальдегид.
  • Спирт (96, 100%).
  • Осмиевая кислота.

Выше перечислены простые фиксаторы. Также для фиксации тканей применяются более сложные варианты фиксаторов (растворы):

  • Спирт-формол.
  • Жидкость Ценкера.
  • Двухромовоокислый калий.

В списках указаны лишь некоторые виды применяемых фиксаторов. Продолжительность необходимого для фиксации образцов тканей периода может варьироваться от нескольких часов до суток.

Длительность зависит от особенностей исследуемых образцов и типа выбранного фиксатора. После того как этап фиксации пройден необходимо произвести промывку материала (в течение нескольких часов) в проточной воде.

Это делается для того чтобы освободить образцы от излишков фиксирующей жидкости и осадочной взвеси.

Мутные непрозрачные образцы не подходят для исследования. Такие кусочки материала не позволят получить необходимую информацию.

Перед тем как приступить к одному из главных этапов – осуществлению среза, образцы промываются чистой водой в течение нескольких часов. Далее, материал подвергается процессу обезвоживания.

Обезвоживание осуществляется при помощи проведения тканевого образца через спирты возрастающей крепости. Этот этап длительный. В каждом спирте кусочки материала находятся от 2-3 часов до суток.

После обезвоживания проводится заливка образцов. Этот этап необходим для уплотнения тканей и получения качественных блоков для исследования. Уплотнение проводится путем замораживания (срочная биопсия) или путем заливки парафином или целлоидином.

Заливка парафином — достаточно длительная процедура (от 24 часов и дольше). Такой вариант уплотнения образцов используется для осуществления исследования в обычном режиме. Для лучшей визуализации отдельных структур тканей срезы окрашивают.

Для окрашивания применяют специальные гистологические красители (кислые, основные, специальные).

Подготовленные к изучению образцы исследуют при помощи специального микроскопа.

Прежде чем приступить к изучению гистологического препарата необходимо убедиться, что последний полностью соответствует ряду обязательных требований:

  • В материале должны быть сохранены прижизненные структуры.
  • Срез должен быть тонким и прозрачным.
  • Структуры, которые требуется подвергнуть изучению должны быть четко визуализированы за счет окрашивания.
  • Препараты должны иметь длительный срок хранения.

При качественном приготовлении препарата достичь соответствия всем перечисленным требованиям достаточно просто. Однако нельзя исключить возможность возникновения небольших погрешностей. Если вовремя распознать некоторые виды неточностей, купировать брак, создать качественный материал вполне возможно.

Самыми распространенными погрешностями при приготовлении срезов можно назвать следующие варианты:

  • Крошение среза.
  • Выпадение материала из парафиновой массы.
  • Невозможность нарезки материала.
  • Разрыв материала.

Те или иные погрешности могут возникать по разным причинам. Иногда в основе нарушения качества образца лежат ошибки во время изготовления. Для устранения каждой погрешности предусмотрены определенные алгоритмы действий.

Методы гистологического исследования

Для осуществления микроскопического исследования необходимы тонкие кусочки материала. Ширина таких кусочков измеряется в микрометрах. Для удобства получения таких срезов используются специальные приборы – микротомы. Конструкция этого прибора предусматривает возможность получения срезов толщиной 5-10 микрометров.

Основным методом исследования в гистологии является микроскопия. При помощи микротома можно изготавливать тончайшие срезы, подходящие для проведения микроскопических исследований. Получение среза происходит за счет движения ножа в одном направлении. Толщина среза задается на этапе срабатывания механизма подъема.

Для изготовления срезов из материала, залитого парафином или целлоидином, используют радиальный, ротационный или санный микротом.

Для получения среза с растительных или животных тканей могут применяться специальные замораживающие микротомы. Для микроскопического исследования используется несколько методов приготовления срезов. Для каждого из методов выбираются определенные виды микротомов и применяются определенные четкие алгоритмы действий.

Гистологические срезы бывают:

  • Ступенчатые.
  • Серийные.
  • Горизонтальные.

Могут производиться срезы фиксированного и нефиксированного материала. Все зависит от характера исследуемых тканей и основных целей проведения означенного исследования. Также в гистологии существуют другие методы приготовления срезов.

Микротомы и их применение

Как уже было сказано выше, срезы в гистологии создаются при помощи специального устройства – микротома. В самом названии заложена расшифровка предназначения прибора – micros (маленький), tome (рассечение). Одним из самых используемых можно назвать санный микротом.

Название прибора произошло от принципа работы механизма, который базируется на подаче ножа с зажимом при помощи специальных салазок. Санный микротом предназначен для осуществления парафиновых срезов.

Как правило, такой прибор работает с одноразовыми лезвиями или кассетами. Такой высокоточный микротом состоит из станины, механизма микроподачи, подъемного механизма, зажимов для блоков, ножедержателя.

Такой аппарат позволяет изготавливать срезы толщиной от 0,5 до 60 микрометров. Санный микротом отличается высокоточной регулировкой толщины среза. Функция подачи материала может быть механической или ручной. Данный прибор предназначен для осуществления рутинных исследований в области медицины, ботаники и биологии.

Ротационный микротом — прибор с неподвижным ножом и подвижным столиком. В приборе предусмотрена моторизованная подача образца. Этот микротом предназначен для использования в гистологической лаборатории для проведения исследований, направленных на решение гистологических и гистопатологических задач.

Для получения срезов с нефиксированных тканей или в тех случаях, когда необходимо срочное проведение исследования используются замораживающие микротомы. Такие приборы снабжены замораживающим столиком, на котором и закрепляется исследуемый образец.

Главным правилом успешного получения гистологического среза при помощи микротома является правильный выбор угла наклона ножа и угла сечения. Наилучшим углом наклона является тот, при котором плоскость лезвия находится параллельно верхней части блока.

Если выбрать угол наклона больший, чем требуется, образуется риск, что срез будет крошиться. При меньшем угле наклона лезвие будет скользить по поверхности материала.

Получение требуемого результата при таком положении ножа невозможно. Величина угла сечения зависит от характера исследуемого материала. Чем образец мягче, тем меньше будет угол резания.

При обработке мягких блоков неплохим вариантом считается косое расположение ножа.

Резание на микротоме

Для приготовления срезов с парафинированных объектов или образцов, обработанных целлоидином, опять же чаще всего используют ротационный микротом.

Сначала блок подвергают обрезке. Это необходимо для устранения свободного парафина или другого уплотнителя. Если эту процедуру не произвести, срез может получиться неравномерным, морщинистым и, как следствие, малоинформативным. Также сморщивания можно избежать при помощи охлаждения исследуемого материала.

Далее, парафиновый блок прочно закрепляется в зажиме. Предварительно необходимо выверить правильный угол расположения ножа и выбрать необходимый угол резания. После этого нужно используя регулировку механизма подачи, установить блок так, чтобы его поверхность находилась от лезвия ножа на расстоянии 0,5-1 мм.

После осуществления подгонки проводится установка микрометрической шкалы для получения первых толстых срезов. После этого производится моделирование блока (срезка излишков парафина, предание прямоугольной формы). Заключительным этапом является выставление микрометрической шкалы на задуманную толщину и осуществление окончательной резки материала.

Иммуногистохимия — показания к проведению, как делают, результат после процедуры

Ультратом - основы гистологии
Иммуногистохимия: что это?

Суть

Иммуногистохимия (иначе ее называют иммуногистохимический анализ) представляет собой исследование, цель которого состоит в обнаружении патогенных клеток в тканевых образцах. Для этой цель используют молекулы, вырабатываемые иммунной системой.

Само название действия тройственное, в него уместились слова, которые сами по себе являются названиями определенных направлений в науке и практике:

  • Иммунология;
  • Гистология;
  • Химия.

Реактивы, которые применяют, насыщены клетками (cellula), структура которых способна антигены к себе притягивать.

Для удобства, наглядности и контроля используют ферменты, начинающиеся проявляться при реакции положительной.

ИГХ – исследование дополнительное с точки зрения диагностики. К нему прибегают в случае отсутствия результатов гистологии, а также для уточнения на уровне молекул характеристик опухоли.

ИГХ имеет практическое применение при:

  • Характеристике клеток;
  • Анализе внутриклеточных процессов и уникальности синтеза, в клетках происходящего;
  • Анализе гормонов и их рецепторов.

Исторический экскурс

Теоретические основы ИГХ-изучения были оформлены сороковые годы XX столетия Альбертом Кунсом. Применяя флуоресценцию, он искал патогенные клетки в замороженных. Позже пришла идея использовать молекулы, вырабатываемые иммунной системой, окрашивать их ферментами. Так было установлено соответствие реакции света и характеристики частиц онкологических.

В середине восьмидесятых аргентинец С.Мильштейн получил Нобелевскую премию за создание гибрида онкологической клетки с лимфоцитом, способной синтезировать моноклональные cellula.

В середине 1990-х гг. С.Тэйлор проверил двадцать тысяч злокачественных образований и установил, что в очень многих случаях поставленный диагноз был ошибочен. Именно тогда ИГХ показала свою эффективность в плане диагностическом.

Зачем проводить после гистологии?

Медицинская практика знает случаи, когда к ИГХ прибегают после гистологического исследования. Это объясняется рядом причин, одна из которых следующая: окончательный диагноз поставить нельзя, вследствие того, что у ракового образования микроскопическое строение очень неспецифичное.

Задачи ИГХ в борьбе с раком

В онкологии методика играет весьма важную роль, которую, конечно же недооценивать нельзя. Благодаря ИГХ, врач может:

  • Отнести рак к определенному типу;
  • Определить, какие белки провоцируют развитие опухолевых очагов;
  • Обнаружить метастазы;
  • Понять, имела ли место трансформация на уровне клеток;
  • Сделать прогноз;
  • Решить вопрос необходимости таргетной терапии;
  • Выяснить, насколько чувствительны патогенные микрообразования к терапевтическому лечению.

Виды

Выделяют два метода ИГХ-изучения – прямой и непрямой.

При прямом нужен один вид молекул-антител. Молекулы эти взаимодействуют с молекулой, которая является мишенью. Если эта патогенная частица присутствует в ткани и есть реакция, опухолевая ткань окрашивается.

Чаще применяют непрямой вид. Здесь необходимы две cellula. Первая начинает взаимодействовать с частицей атипичной, вторая вступает во взаимодействие с полученным комплексом «атипичная cellula – антитело». Маркер, который изменил свой цвет, связывают со второй частицей.

У непрямого ИГХ-изучения есть неоспоримое преимущество – чувствительность его более выше.

Еще одно преимущество в том, что для проведения диагностики по второму виду, нужно ограниченное количество молекулярного материала.

Этапы

Можно выделить несколько этапов подготовки к проведению ИГХ-изучения.

  1. Проведение биопсии.
  2. Биоптат фиксируют и помещают в парафин, который сохраняет структуру ткани;
  3. Делают тончайшие срезы.
  4. Срезы раскладывают на клейкое стекло;
  5. Удаляют парафин.
  6. Проводят анализ, используя микроскоп.

Перспективы

Перспективы, ИГХ, можно объединить в две группы:

  • Обнаружение патологии;
  • Лекарственная чувствительность.

Диагностические цели таковы:

  • Окончательный вариант диагностического анализа;
  • Уточнение степени раковой опухоли;
  • Дифференцирование образований и процессов, с опухолями не связанными;
  • Различение опухолевых процессов, присутствующих в организме.

Некоторые возможности с точки зрения препаратной чувствительности:

  • Рецепторы стероидных гормонов;
  • Белок Her2/neu;
  • Рецепторы соматостатина 2А и 5 типов;
  • PD-L1;
  • Индекс пролиферативной активности (Ki-67);
  • ALK, некоторые иные.

Мишени

Мишени – это опухолевые маркеры, и их достаточно много. Именно поэтому перед началом проведения процедуры врач четко должен понять предмет поиска.

Маркеров нет в здоровых микрообразованиях либо, а, если они есть, их количество довольно незначительно. Назовем несколько примеров:

  • Альфа-фетопротеин;
  • Цитокератины;
  • Фермент CD10 (CALLA), некоторые иные.

Плюсы

У методики следующие плюсы:

  • Минимальное количество биоптата и реактивов;
  • Быстрый результат;
  • Определение рака на начальной стадии его развития;
  • Точность и достоверность;
  • Возможность получения трехмерной картинки.

Ответ на взаимодействие с клеткой, выработанной иммунной системой, проявляется уже через три часа. Через неделю готовится окончательное заключение, в котором установлены:

  • Тип онкологии;
  • Стадия;
  • Первичный очаг.

Погрешность минимальна, но она также может возникнуть, если пациент не придерживался рекомендаций по подготовке к процедуре.

Сроки выполнения

Сроки выполнения ИГХ-изучения определены Приказом Минздрава России №179н от 24.03.2016 г.:

  • С использованием до 5 маркеров включительно – не более 7 рабочих дней;
  • С использованием более 5 маркеров – не более 15 рабочих дней.

Роль в современной онкологии

ИГХ дает возможность досконально изучить все аспекты злокачественных опухолей, чего нельзя сказать о других диагностических способах.

Роль ее в уточнении прогнозов и назначении правильного лечения трудно переоценить.

В клинике интегративной онкологии Onco.Rehab всегда ответят на Ваши вопросы, дадут совет, где лучше пройти иммуногистохимию.

Гистология при онкологии и раке в Москве, проведение гистологических исследований в Европейской клинике

Ультратом - основы гистологии

Гистологическое исследование, по сути, является методом диагностики заболевания на тканевом уровне — исследование врачом-патологоанатомом под микроскопом специально подготовленного участка патологической ткани позволяет получить представление о сути и выраженности патологического процесса, выявить его особенности и благодаря этому точно поставить диагноз и подобрать требуемое лечение. В онкологии гистологическое исследование играет роль «третейского судьи» — только заключение патологоанатома о наличии патологических клеток даёт право клиницисту поставить диагноз «рак». Гистологическое исследование широко применяется практически во всех медицинских специальностях и всегда выполняется после любой операции, но именно в онкологии оно имеет особое значение.

Как получают материал для гистологического исследования?

Процесс получения фрагмента ткани для гистологического исследования называется биопсия. Выделяют следующие виды биопсии:

  • Кор-биопсия. Выполняется специальной иглой и автоматическим биопсийным пистолетом.
  • Аспирационная биопсия. Применяется для забора жидкостного содержимого образований, например, кист или плевральной полости.
  • Тонкоигольная аспирационная биопсия. Подвид аспирационной биопсии, материал забирается с помощью шприца и специальной иглы с заостренным или фестончатым краем. При таком методе возможно получить для исследования не только жидкостное содержимое, но и кусочек ткани.
  • Аспирационно-режущая биопсия. При этом методе одной иглой берутся и фрагменты ткани, и клеточный материал для исследования.
  • Трепанбиопсия. Забор производится трепаном — инструментом, представляющим собой полую трубку с заострённым концом. Применяется для взятия биопсии из костной ткани.
  • Эксцизионная биопсия. Подразумевает удаление всего патологического образования (например, опухолевого узла) целиком. Наглядным примером эксцизионной биопсии является удаление увеличенного лимфатического узла при подозрении на лимфому.
  • Скарификационная биопсия. Забор выполняется путём срезания тонкого пласта ткани, широко применяется для исследования новообразований кожи.
  • Щипковая биопсия. Выполняется специальными биопсийными щипцами, часто применяется при заболеваниях желудочно-кишечного тракта.
  • Браш-биопсия. Материал для исследования забирается с помощью специальной щёточки путём его соскабливания — например, со стенки бронха.
  • Петлевая биопсия. Забор гистологического материала производится петлей одновременно с работой коагулятора. Применяется в отоларингологии, гинекологии.
  • Отпечаток. Применяется при необходимости исследования отделяемого из эрозии или язвы — предметное стекло прикладывается к изъязвленной поверхности.
  • Мазок-отпечаток. Материал для исследования снимается скальпелем, шпателем или специальной щёточкой и переносится на предметное стекло.

Как выполняется биопсия?

Биопсия проводится обычно под местной анестезией, в случае, если образование располагается достаточно глубоко — под контролем УЗИ или рентгена. От пациента не требуется какой-либо специфической подготовки (кроме, пожалуй, психологического настроя).

Время процедуры не ограничено — если выполняется скарификационная биопсия или мазок-отпечаток, то требуется буквально несколько минут, а если речь идёт о биопсии глубоко расположенного образования, особенно вблизи крупных сосудов или нервов, то времени требуется значительно дольше.

В процессе выполнения биопсии иглу проводят к образованию и, в зависимости от выбранного метода, либо выполняют аспирацию одновременно с продвижением иглы к центру образования (если проводится аспирационная биопсия), либо вводят иглу в образование и фиксируют внутри неё столбик ткани (если проводится кор-биопсия).

Процесс получения ткани с помощью биопсийной игры на сегодняшний день является либо полуавтоматическим, либо автоматическим.

При полуавтоматическом процессе продвижение желобка с иглой в патологический очаг производится вручную, а активизация канюли в игле, которая и захватывает ткань, происходит автоматически с помощью подпружиненного спускового механизма.

В автоматическом варианте используется специальный биопсийный пистолет, и врачу требуется только поднести его к интересующей области.

Также возможно провести биопсию во время выполнения диагностического эндоскопического исследования, например, ЭГДС или бронхоскопии. В этом случае забор гистологического материала происходит практически безболезненно для пациента, хоть и причиняет определённый дискомфорт.

Кроме того, на гистологическое исследование будут направлены ткани, удалённые во время операции. Следует отметить, что в отдельных случаях операция может быть назначена как раз для получения гистологического материала (например, назначение раздельного диагностического выскабливания матки и цервикального канала с целью установить причину гинекологического заболевания).

Виды гистологического исследования

В первую очередь проводится собственно гистологическое исследование, то есть изучение специально подготовленной ткани, взятой при биопсии, под микроскопом. Процесс подготовки ткани для исследования включает несколько этапов.

  1. Кусочек ткани обезвоживают и пропитывают парафином, тем самым формируя небольшой кубик, в который и заключена ткань.
  2. Далее с парафинового кубика выполняют срезы микротомом, причём толщина срезов может достигать 3 микрометров.
  3. Срезы переносятся на стекло, подготавливаются к окрашиванию и окрашиваются одним из известных методов с целью облегчения определения и дифференцировки отдельных структур ткани при проведении исследования.

Таким образом, процесс подготовки ткани к гистологическому исследованию достаточно длительный, чем и объясняется получение заключения врача через несколько дней после биопсии.

Однако в случае, когда требуется срочное исследование (например, оценка краёв резекции в ходе операции или же исследование сторожевого лимфоузла при раке молочной железы), процесс подготовки ткани может быть сокращён до получаса, однако в этом случае качество полученного гистологического препарата существенно ниже, поэтому после операции проводится тщательное изучение биоматериала в плановом порядке.

Описание процесса подготовки ткани к гистологическому исследованию неслучайно описано столь подробно, поскольку нередки ситуации, когда пациент хочет получить второе мнение или же продолжить лечение в другом учреждении.

В этой ситуации целесообразно взять и готовые гистологические препараты («стёкла»), и, по возможности, парафиновые блоки, так как проводящий исследование патологоанатом может при необходимости дорезать несколько срезов с блока, применить иной вид гистологических красителей и провести дополнительные исследования на большем количестве биопсийного материала.

Какие исследования могут дополнять изучение срезов под микроскопом? В первую очередь это иммуногистохимическое исследование, позволяющее определить гистологическую принадлежность опухоли, что крайне важно, например, при исследовании метастаза из невыявленного первичного очага. В этом случае оценивается экспрессия различных генов и их белков в ткани.

Также при раке молочной железы иммуногистохимическое исследование позволяет определить, есть ли у опухоли рецепторы к эстрогену и прогестерону, и, соответственно, назначить требуемое при выявленном молекулярном подтипе химиотерапевтическое лечение и гормонотерапию.

Наконец, определение экспрессии белка Her2/neu позволяет заключить, показана ли больному раком молочной железы или раком желудка таргетная терапия.

Отдельно хотелось бы остановиться на цитологическом исследовании. В отличие от гистологического исследования, при котором предметом изучения являются ткани, при цитологическом анализе изучаются отдельные клетки на предмет патологических отклонений.

Цитологическое исследование обладает меньшей точностью, нежели гистологическое, но позволяет дать заключение о природе заболевания в тех случаях, когда невозможно получить кусочек ткани (например, при анализе плеврального выпота — является ли он связанным с опухолевым поражением плевры или нет — или смывов с брюшины в случае подозрения на метастатические отсевы рака яичников).

Показания для проведения гистологического исследования

Гистологическое исследование — наиболее точный метод диагностики, к которому следует прибегать, когда все другие исследования в совокупности не могут однозначно указать на конкретный диагноз.

В первую очередь выполнение гистологического исследования показано пациентам с подозрением на злокачественное новообразование или с уже подтвержденным диагнозом «рак». В первом случае результат исследования даёт право врачу окончательно поставить диагноз. Во втором случае выполнение гистологического исследования показано, чтобы:

  • отслеживать динамику, например, подтвердить отдаленное метастазирование;
  • менять тактику лечения сообразно результатам, например, если больной раком молочной железы химиотерапия проводилась до операции, а результаты послеоперационного гистологического исследования не показали полного ответа опухолевых клеток на лечение, в отдельных случаях возможно назначить таблетированную химиотерапию в послеоперационном периоде.

Далее, гистологическое исследование показано в случае заболеваний, которые по своей сути являются доброкачественными, но обладают потенциалом к озлокачествлению.

Таковыми являются, например, полипы кишечника; сами по себе они не несут угрозы для жизни, но потенциально могут переродиться в опухоль, поэтому полипы после удаления обязательно подлежат исследованию с целью определить, не появились ли в них опухолевые структуры.

Широкое применение гистологического исследования наблюдается и при неопухолевых заболеваниях.

В гастроэнтерологии и гинекологии исследование тканей и клеток, помимо исключения опухолевого процесса, также предназначено для оценки воспалительных процессов и их динамики, выявления эндокринных нарушений.

Большую роль гистологическое исследование имеет и при лечении аутоиммунных заболеваний, позволяя оценить степень активности патологического процесса и тяжесть поражения, а также ответ на проводимую терапию.

Наконец, гистологическое исследование, а, вернее, его подвид — цитологическое исследование — нашло своё место и в скрининге. Исследование мазка-отпечатка с шейки матки позволяет определить предраковое состояние или уже развивающуюся опухоль, и простота и эффективность данного метода позволила включить мазок в скрининг на рак шейки матки.

Следует отметить, что противопоказаний как таковых к проведению гистологического исследования нет, так как забор гистологического материала является малоинвазивной и хорошо переносимой процедурой.

Возможные осложнения могут быть связаны с индивидуальной реакцией пациента на анестетики или же с нарушением свёртываемости крови.

В любом случае пациенту назначается покой и холод на место проведения биопсии, анальгетики при болях.

Результат гистологического исследования

Результат гистологического исследования будет готов спустя несколько дней после выполнения биопсии, что связано с этапной подготовкой исследуемой ткани и изучением биоматериала врачом-патологоанатомом под микроскопом.

Результатом может быть как короткое заключение с указанием установленного тканевого строения патологического образования (например, «инвазивный дольковый рак»), так и подробное описание всех изменений в строении ткани и составляющих её клеток.

Расшифровкой результатов гистологии должен заниматься лечащий врач, так как гистологическое исследование назначается именно им и с совершенно определенной целью. Полученное заключение по цитологическому или гистологическому исследованию поможет врачу в установке клинического диагноза и в подборе требуемых на данный момент методов лечения.

Гистологическое исследование является одним из методов диагностики злокачественных новообразований и ряда доброкачественных заболеваний. Врачи Европейской клиники обладают высочайшей квалификацией для интерпретации результатов исследования и назначения требуемого лечения.

Гистологические исследования

Ультратом - основы гистологии

Гистологическое исследование биопсийного материала — микроскопическое изучение биологического материала, взятого из тканей органа, в котором было обнаружено новообразование. Гистология является неотъемлемой частью комплексного обследования для того, чтобы подтвердить или опровергнуть промежуточный диагноз, а также для изучения динамики патологического процесса.

Когда назначают гистологическое исследование?

Забор образца требуется для того, чтобы решить ряд задач:

  • установить точный диагноз и способ лечения;
  • определить стадию патологического процесса;
  • наблюдать развитие заболевания;
  • дифференцировать различные болезни;
  • установить распространение опухоли;

Кроме того, гистология позволяет наблюдать и контролировать изменения в тканях после лучевой и цитостатической терапии.

Гистологическое исследование активно применяется в гинекологии, гастроэнтерологии, пульмонологии, оториноларингологии, при этом данные лабораторного тестирования применимы для дальнейшего лечения как мужчин, так и женщин.

Администрация АО «ЦЭЛТ» регулярно обновляет размещенный на сайте клиники прейскурант. Однако, во избежание возможных недоразумений, просим вас уточнять стоимость услуг по телефону: +7 (495) 788 33 88

Название услугицена (руб)
Гистологические исследования биопсийного материала
Гистологическое исследование биопсийного материала костей (и хрящевой ткани)3 700
Гистологическое исследование биопсийного материала лимфоузлов3 500
Гистологическое исследование биопсийного материала мочевыводящих путей2 500
Гистологическое исследование биопсийного материала мышечной ткани2 800
Гистологическое исследование биопсийного материала полости рта, языка, носоглотки, слюнных желез2 500
Гистологическое исследование биопсийного материала тканей сустава2 800
Гистологическое исследование биопсийного материала ткани забрюшинного пространства2 800
Гистологическое исследование биопсийного материала ткани костного мозга4 500
Гистологическое исследование биопсийного материала шейки матки, влагалища2 800
Гистологическое исследование биопсийного материала яичек2 800
Гистологическое исследование пайпель-биопсии эндометрия2 800
Гистологическое исследование простое биопсийного материала кожных и подкожных новообразований2 500
Гистологическое исследование сложного биопсийного материала кожных и подкожных новообразований2 800
Гистологические исследования операционного материала
Гистологическое исследование операционного материала (анальная трещина, грыжевые мешки, желчный пузырь, стенка раневого канала, ткань свищевого хода и грануляции, аппендикс)2 500
Гистологическое исследование операционного материала (предстательная железа (ТУР и эктомия), легких, желудка, матки (экстирпация матки с придатками), кишечника, почек, молочной железы и других органов без лимфоузлов (сальника).6 000
Гистологическое исследование операционного материала (придатки матки, секторальная резекция молочной железы, узлы миомы матки, лимфоузлы, сальники).3 300
Гистологическое исследование операционного материала (придаточных пазух носа, аневризма сосуда, варикозно расширенные вены, геморроидальные узлы, миндалины (при тонзилитах), аденоиды, эпулиды, кисты яичника)2 500
Гистологическое исследование операционного материала (соскобы цервикаль. канала, соскобы полости матки)2 700
Гистологические исследования пункционного материала
Гистологическое исследование пункционного материала молочной железы4 000
Гистологическое исследование пункционного материала печени3 500
Гистологическое исследование пункционного материала почек3 500
Гистологическое исследование пункционного материала предстательной железы6 300
Гистологическое исследование пункционного материала щитовидной железы4 000
Гистологические исследования эндоскопического материала
Гистологическое исследование эндоскопического материала (простое — до 3 кусочков) пищевода, желудка, кишки, бронха, гортани, трахеи.2 500
Гистологическое исследование эндоскопического материала (сложное — более 3 кусочков) пищевода, желудка, кишки, бронха, гортани, трахеи.2 500
Гистологическое исследование эндоскопического материала + Выявление Helicobacter pylori3 500
Дополнительные услуги (гистологические)
Second Opinion — Консультация готового гистологического препарата за 1 стекло3 350
Дополнительное изготовление микропрепаратов700
Реставрация доставленных готовых препаратов700
Фотосканирование2 650
Фотофиксация препарата2 300
Иммуногистохимические исследования
Second Opinion — Консультация готового препарата перед ИГХ2 900
Иммуногистохимическая диагностика опухоли предстательной железы (Ck5, P63, AMACR)7 800
Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса рака молочной железы (PR, ER, ki67, Her2 neu)9 000
Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса эндометрия (стадия секреции) — расширенное10 500
Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса эндометрия (стадия секреции) — стандартное8 250
Иммуногистохимическая диагностика хронического эндометрита (фаза пролиферации)6 800
Иммуногистохимическое исследование ( 1 антитело)3 300
Консультация готового препарата (1 стекло)2 800
Определение прогностического маркера (1 маркер)7 500

Как происходит забор материала?

Биопсия — хирургический метод, с помощью которого извлекается образец ткани из области поражения. Биопсия является одним из основных способов диагностики в комплексе ультразвукового исследования, рентгена, магнитно-резонансной томографии, КТ.

Данный метод позволяет диагностировать гепатит, патологические процессы щитовидной железы и толстой кишки, неврологические, гинекологические и урологические заболевания.

В процессе хирургического вмешательства могут быть полностью или частично извлечены:

  • соединительные и мышечные ткани;
  • внутренние органы;
  • кожные покровы;
  • слизистая ЖКТ и бронхов;
  • лимфоузлы;
  • костный мозг;
  • простата и шейка матки.

Существует несколько основных способов взятия биоматериала:

  • экзициозный (полное иссечение новообразования или тканей органа);
  • инцизионный (частичное извлечение органа или опухоли);
  • пункционный (сбор материала с помощью прокола тонкой полой иглой);
  • аспирационный (использование тонкой иглы для извлечения образца);
  • трепан-биопсия (забор костного образца толстой иглой);
  • щипцовой (отщепление части ткани или органа);
  • кюретаж (методика удаления отложений).

Биопсия проводится в открытой форме, при которой материал для исследования получают на основе мазка и смыва. Для процедуры может использоваться также рентгенография, УЗИ. В зависимости от того, производится ли только забор образца или полное иссечение органа, биопсия носит диагностический или лечебный характер. Данные лабораторного исследования используются в гистологии и цитологии.

Расшифровка результатов

По результатам гистологического исследования оцениваются размеры взятого материала, его цвет, свойства и концентрация, а также патологические изменения в тканях, их атипичного роста и так далее.

Недостаточное количество биоматериала или отсутствие в нем патологии может дать ложноположительный результат, поэтому необходимо соблюдать правила забора исследуемого образца.

Изучение результатов гистологии входит в обязанности патологоанатома или патоморфолога. Они изучают историю болезни пациента и на основе клинических данных составляют заключение. В случае однозначных итогов лабораторных тестов, специалисты ставят окончательный диагноз. Спорные случаи врачи обсуждают на консилиуме.

Диагноз устанавливается согласно нормам ВОЗ или министерства здравоохранения страны.

Длительность гистологического исследования обычно длится от 1 недели, если образец был взят из мягких тканей и около 2 недель, если это образец костных тканей.

Транспортировка биоматериала сопровождается записью в специальном журнале и производится в тщательно упакованной таре ответственным лицом для передачи лаборанту.

Знай об организме
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: